非洲猪瘟于2014年传入欧洲，欧盟27国均受到了肆虐传播。由于当前没有确认安全可靠的疫苗，提升生物安全措施、确保清洁到位、严格规范消毒程序依然是预防猪场感染的重要控制手段。本篇文章对各类化学消毒剂灭活ASFV的效果进行了综述，对一线防非具有指导性意义。 

01 非瘟病毒的特性和分类 

ASFV是一种大型双链DNA病毒，目前被归类为Asfarviridae科、Asvirus属的唯一成员。此病毒呈二十面体，长约200nm，由同心层组成：内核、核壳、内膜、囊膜，在细胞外病毒还有外包膜。 

根据病毒对化学制剂的耐药性，病毒被分为 A、B、C三类。其中，ASFV属于A类病毒，其体积中等或较大，含有脂质，对清洁剂、肥皂、所有消毒剂和脱水剂都非常敏感，除非环境潮湿凉爽，否则通常不会存活很长时间。 

02 评估杀毒活性的实验室方法 

自1989年以来，欧洲标准化委员会(CEN)一直在制定消毒剂和防腐剂功效的测试方法。其中，可用于测试化学化合物杀病毒活性并常被ASFV相关研究采用的方法分为：悬浮试验和载体试验。悬浮试验即细胞培养的ASFV与液态消毒剂接触。相比之下，在载体试验中，病毒被涂抹在表面上，晾干后再使用消毒剂喷洒或者进行液态接触。无论是哪种方法，实验中用于验证化学化合物杀病毒活性的测试方法都有一个共同目标，即根据测试方法在病毒与接受测试的化学化合物/消毒剂发生物理接触后，需要证明病毒滴度降低了3或4 Log10。 

03 针对ASFV的化学化合物试验 

目前，对ASFV有效的消毒剂可分为八类: 酸、醛、氯和氯化物、碘化物、氧化剂、酚化物和季铵化合物。近年，有相关研究还对几种植物提取物进行了抗ASFV的测试。 

图1.经测试的抗非洲猪瘟有效消毒剂清单（部分） 

酸类 

酸性化合物分为有机和无机两种。这两类酸都能通过降低 pH 值灭活病毒，有机酸则通过亲脂结构与包膜病毒的膜相互作用灭活病毒。无机酸 (柠檬酸除外)因其腐蚀性而在使用上受到限制。柠檬酸是一种固体有机化合物，可安全地用于个人用途和衣物去污。 

研究发现，对多孔表面和无孔表面来说，使用1%和2%浓度的柠檬酸处理10-20分钟，均使得病毒滴度降低了4 Log10。同时，只有在低浓度污染条件下，使用较高浓度 (3%和2%)醋酸能将病毒滴度降低4 Log10, 而在高浓度污染条件下，只有3%的醋酸能将ASFV滴度降低降低4 Log10。 

碱类 

氢氧化钠(烧碱)和碳酸钠（洗涤碱）是这类化学品的主要代表化合物，在有机物大量存在的情况下仍能保持其消毒特性。但是，长时间接触高浓度的的氢氧化钠可能会对眼睛、皮肤、消化系统或肺部造成严重影响。 

研究人员在低度污染条件和高度污染条件下，对1%、2%和3%浓度的烧碱对ASFV BA71V毒株的灭活效果进行了测试。结果发现，接触30分钟，所有浓度的烧碱在两种污染程度下均有效。 

而对于碳酸在对无孔表面 (钢和塑料) 上的灭活效果来说，研究发现，4%浓度的碳酸钠与ASFV作用30分钟后并不能将ASFV滴度降低4 Log10（108.3TCID50/mL的初始滴度）。 

醛类 

醛是一种有机化合物，可通过烷基化蛋白质的氨基和疏基以及瞟吟碱基来灭活病毒。需要注意，有机物存在时，醛类的功效会降低。 

一项研究证明，采用悬浮法测试了三种不同浓度的戊二醛水溶液对ASFV BA71V株的效果：在低水平污染条件下，所有测试浓度（0.1、0.5 和 1%）的戊二醛溶液均能有效降低病毒滴度4 Log10。 

关于甲醛对于ASFV的杀毒活性研究较少。虽然有研究显示甲醛对细胞培养物有细胞毒性作用，但是目前还没有关甲醛对 ASFV灭活效果的数据。但是由于这种化合物对人体的毒性大，甲醛并不是农场内的主流消毒剂。 

氯和氯化物 

这组化合物的消毒活性基于氧化作用，使蛋白质变性。其中，氯化物的应用更广泛，例如，液体次氯酸钠和固体次氯酸钠。这类消毒剂价格低廉，药效迅速，但具有腐蚀性，其稳定性与pH值有关，pH值过高时，这类消毒剂的药效会下降。 

碘化合物 

碘化合物的作用模式基于对膜的破坏以及与蛋白质、脂类、酶和疏基化合物的相互作用，主要用作抗菌剂或抗病毒剂，对人、动物和环境都是安全的。 

现有研究表明，使用3%浓度的四甘氨酸钾三碘化物，通过1:200和1:400最终稀释后（相当于 0.0015% 和 0.0075%）的消毒剂具有杀毒效果。 

另一研究则通过悬浮法和喷雾法，对高络合聚维酮碘与市售聚维酮碘进行了对比测试。实验证明，0.25%的高络合聚维酮碘，接触5分钟可完全灭活ASFV（滴度为105TCID50/mL），而1%市售聚维酮碘则需要通过使用喷雾法对杀灭病毒起效。 

氧化剂 

氧化剂通过产生自由释基来氧化脂质和核酸，从而起到消毒作用。有机物的存在会严重影响其功效。 

有实证研究表明，使用5、10和20 mg/L臭氧水在室温下持续 1、3、6和10分钟。能让ASFV滴度从2 Log10降低到3 Log10 ，但没有达到4 Log10。此外有研究发现，对于在低度和高度污染条件下，稀释度为0.5%和1%时的过氧化单硫酸钾均能有效地使病毒滴度下降4 Log10。 

苯酚化合物 

酚类化合物的杀病毒作用机理主要是由于蛋白质在高浓度下变性和沉淀。酚类化合物在有机物存在的情况下仍能保持其活性。 

最近的一项研究根据欧盟标准的悬浮法对苯酚进行了测试。该商用产品的测试浓度分别为 0.5%、1% 和2%，其中浓度为 1%的苯酚在30分钟的接触时间内能对低浓度和高浓度污垢条件下的ASFV有效，而测试的最高稀释度会对细胞培养物产生细胞毒性作用。 

季铵化合物 

季铵化合物是一种阳离子表面活性剂 (表面活性剂) ，兼具杀菌和杀病毒 (一般只杀包膜病毒) 活性以及良好的去污力，因此具有清洁能力。使用安全且价格低廉。 

最近一项研究对一种基于苯扎氯铵的不同商业产品进行了测试。研究发现，在低度污染条件下，只有1%的稀释度会导致病毒滴度下降4.25 Log10。在最高稀释度下，由于细胞毒性效应无法评估产品的杀病毒活性。 

植物提取剂 

最近，根据联合国ENI标准，对 14 种不同的植物提取物进行了低浓度和高浓度测试：在+10℃条件下，以30%、60%和80%的浓度对BA71V ASFV菌株进行了30分钟的测试。只有薄荷提取物在30%的活性度下可减少4 Log10。 

04 总结 

现有的消毒化学剂对ASFV的研究还具有较大局限性：一方面，虽然本综述内的大多数研究采用了国际标准来调查研究制剂的杀毒活性，但是目前大多数产品的研究都采用了悬浮法，而实际上，采用载体测试法更能更好模拟现场条件，因为病毒不是悬浮的。另一方面，这些研究仅限于使用于使用基因Ⅰ型和Vero适应型ASFV株系，如 BA71V株系和Lisbon 60株系。 

2%的醋酸和柠檬酸对同一ASFV株系(BA71V)有效，人员安全性较高，其中柠檬酸的消毒效果更佳。 

1%浓度的烧碱作用30分钟后能有效杀灭ASFV。虽然是净化动物栏舍非常有效的化学制剂，但是由于其强腐蚀性作用，对消毒人员造成较大安全风险。氢氧化钙和碳酸钠的研究较少，无法证明这两种物质对ASFV的有效作用。 

使用1%的戊二醛对接触时间为30分钟的ASFV有效。戊二醛广泛用于兽医行业，但对皮肤和眼睛有刺激性，建议在ASFV爆发时使用。甲醛对人体毒性大，一般不推荐使用。 

氯化合物和氧化剂这两类化学制剂，在没有有机物存在时，才能发挥高效作用，因此在选择这些化合物时需要进行彻底清洁。在净化过程中，它们对多种金属具有腐蚀性，因此在规受感染猪舍的净化工作时应考虑到这一点。